Palavras-chave
gene tpi
genotipificação
variabilidade genética
epidemiologia
Como Citar
Resumo
Giardia duodenalis é um protozoário que causa infeção em humanos e animais, que se pode transmitir por via hídrica, de pessoa a pessoa ou por contacto com animais, sendo uma das infeções intestinais mais frequentes no nosso país, representando uma preocupação de Saúde Pública. O seu estudo epidemiológico requer a caracterização molecular dos parasitas utilizando genes com grande variedade como o que codifica a triose-fosfato isomerase (tpi) e analisando a homologia entre isolamentos.
O objetivo do trabalho é estabelecer o critério de identidade que permita a comparação epidemiológica dos isolamentos de Giardia.
Recolheram-se 2-3 amostras de fezes, em dias alternados, de 26 pacientes com giardíase. Após a extração de ADN, um fragmento do gene tpi e um fragmento do gene de beta-giardina (bg) foram amplificados por técnicas de PCR, que foram utilizadas como comparação. Os fragmentos obtidos foram sequenciados e as sequências analisadas com os programas BioEdit y DnaSP v.5.0.
As sequências do gene tpi mostraram uma elevada divergência, com valores de diversidade Π entre 0 e 0,21219. O aparecimento de múltiplos picos no cromatograma indicaram a presença de vários clones na mesma amostra. As diferenças entres isolamentos do mesmo paciente foram iguais ou maiores que as encontradas para o conjunto de todas as amostras.
A variabilidade do gene tpi não permite estabelecer alguns critérios de identidade necessários para a identificação de isolamentos. As infeções mistas intragenótipo ocorrem de uma forma muito frequente, sugerindo uma implicação da via ambiental como principal fonte de transmissão e/ou uma variação genética muito elevada.
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